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超高效液相色譜的原理是哪些

時間：2024-01-22 來源：作者：我要糾錯

超高效液相色譜（UHPLC）技術(shù)由于其高效和快速的分析速度，在現(xiàn)代實驗室分析中已越來越受到青睞。它是高效液相色譜（HPLC）技術(shù)的一個升級版本，通過使用小于2微米尺寸的顆粒作為固定相，配合更高的操作壓力，實現(xiàn)了更快的分析速度和更高的分辨率。UHPLC的發(fā)展代表了液相色譜技術(shù)的一大進步，使得它成為了許多科研和工業(yè)領(lǐng)域中不可或缺的分析工具。

UHPLC的顯著特點之一是其使用的固定相顆粒尺寸遠小于傳統(tǒng)HPLC所使用的。傳統(tǒng)HPLC中使用的顆粒尺寸通常在3至5微米之間，而UHPLC能夠使用小于2微米的顆粒，這大幅增加了色譜柱的理論塔板數(shù)，從而提供了更好的分辨率和峰形。顆粒越小，固定相的表面積就越大，樣品分子在固定相與移動相之間的傳遞也就越迅速，這樣不僅提高了分離效率，同時也降低了分析所需的時間。

與此同時，為了適應更小的顆粒和提高的分離效率，UHPLC系統(tǒng)能夠承受更高的操作壓力，通常超過10000 psi。相比之下，傳統(tǒng)的HPLC系統(tǒng)通常工作在不超過3000至5000 psi的壓力下。這種高壓力的應用，允許使用更細小的柱內(nèi)徑，而且有助于維持合理的流動速率，即使在使用細小顆粒的情況下。這樣不僅減少了所需的溶劑量，還縮短了分析時間，提高了樣品吞吐量。

高效液相色譜儀的原理是基于混合物中不同組分在固定相與移動相之間的相對親和力差異。樣品在注入系統(tǒng)后，會被移動相（也稱為流動相）帶入包含固定相的色譜柱。不同的樣品組分會由于與固定相的相互作用力不同而在色譜柱中以不同的速度移動，從而實現(xiàn)分離。檢測器則根據(jù)各組分的特性，如紫外吸收、熒光或折射率等，檢測通過色譜柱的組分。每一個組分的檢測信號通常被繪制成峰，組成色譜圖譜。UHPLC與HPLC在原理上是相同的，只是UHPLC在操作壓力、顆粒大小和系統(tǒng)精度上有所提高。